Nouveaux biocapteurs sélectifs pour la détection des cations et des protéines dans les liquides biologiques

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2025-07-10
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Résumé La détection précoce à faible concentration, par des méthodes non invasives, des biomarqueurs cardiaques dans les fluides physiologiques a suscité un intérêt croissant de la part de la communauté scientifique au cours de la dernière décennie. Cette approche permet un diagnostic anticipé et une prédiction plus précoce des premiers signes de l’insuffisance cardiaque (IC). À cet égard, l’analyse de la salive humaine s’impose comme le milieu le plus adapté à cette stratégie non invasive, en raison de sa richesse en informations biologiques utiles pour le suivi de la santé générale et des pathologies. Dans ce travail, nous avons développé un immunocapteur multiplexé à haute sensibilité, permettant la détection simultanée directe du peptide natriurétique de type B aminoterminal (NT-proBNP) et du cortisol dans la salive artificielle humaine (AS). La plateforme de biocapteur élaborée repose sur un substrat en nitrure de silicium, intégrant quatre microélectrodes de travail (WE) en or ainsi qu’une microélectrode de référence et une électrode auxiliaire intégrées. Les électrodes de travail en or ont été biofonct ionnalisées à l’aide d’un composé diazonium carboxylique (4-aminophénylacétique, 4-APA), afin d’immobiliser simultanément les anticorps anti-NT-proBNP et anti-cortisol. Le greffage électrochimique du 4-APA sur les surfaces des WE en or a été réalisé par voltampérométrie cyclique (CV), tandis que l’interact ion ant icorps/ant igène dans le tampon PBS a été suivie par spectroscopie d’impédance électrochimique (EIS). La détection des ant igènes dans la salive artificielle humaine a été effectuée à l’aide de l’EIS, combinée à la méthode d’addit ion standard. L’immunocapteur s’est révélé hautement sensible et spécifique vis-à-vis des biomarqueurs cibles, que ce soit dans le PBS ou dans la salive artificielle, même en présence d’interférents biologiques potentiels tels que le facteur de nécrose tumorale alpha (TNF-α) et l’interleukine10 (IL-10). La limite de détection (LOD) obtenue pour le NT-proBNP était de 0,2 pg/mL, dans une plage de concentration allant de 0,03 à 0,9 pg/mL, tandis que celle du cortisol était de 0,06 ng/mL, dans une plage allant de 0,02 à 0,6 ng/mL. L’immunocapteur développé présente un fort potentiel pour la détection sensible et rapide de biomarqueurs dans les milieux physiologiques. Il constitue un outil prometteur pour le diagnostic simultané de multiples analytes, tout en réduisant considérablement le temps d’analyse.
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